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法國科瑪嘉VRE顯色培養(yǎng)基
更新時間：2024-05-15
法國科瑪嘉VRE顯色培養(yǎng)基用于耐萬古霉素糞腸球菌（E.faecalis）和尿腸球菌（E.faecium）的鑒定和計數(shù)。【組分】瓊脂 15.0g/L蛋白胨和酵母浸出物 20.0 g/L色素 27.3 g/L
抗萬古霉素腸球菌（VRE）顯色培養(yǎng)基使用說明書
法國科瑪嘉VRE顯色培養(yǎng)基
用于耐萬古霉素糞腸球菌（E.faecalis）和尿腸球菌(E.faecium)的鑒定和計數(shù)。
【組分】
瓊脂 15.0g/L
蛋白胨和酵母浸出物 20.0 g/L
色素 27.3 g/L
鹽類 5.0 g/L
PH 6.8±0.2
根據(jù)需要，可以進行經(jīng)典配方的調(diào)整或補充。
【操作】
- 稱取瓶內(nèi)干粉67.3g，用1000ml蒸餾水或純水溶解，可以按照67.3 g/L的比例擴大或 縮小。
- 將上述干粉緩慢倒入蒸餾水中，充分攪拌直至瓊脂*溶解。
- 加熱至100℃，并且不斷攪拌。如果使用高壓鍋，請不要加壓，加熱不能超過100℃。使用微波爐加熱時，在煮沸后立即移出微波爐并不斷攪拌，而后移入微波爐再加熱，直至*溶解（大氣泡代替泡沫產(chǎn)生，大約需要2分鐘）。
- 把VRE基礎(chǔ)培養(yǎng)基冷卻至45－50℃?zhèn)溆茫嘶A(chǔ)培養(yǎng)基為乳白色。
- 取增補劑一瓶，加入1ml 54%酒精溶解，以無菌操作把增補劑加入到備用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，輕輕混合均勻(使其終濃度為60mg/L)，避免氣泡，也可按照60mg/L的比例擴大或縮小 。
- 使用傾注程序：準備直徑為90mm的已滅菌的帶蓋培養(yǎng)皿，每個培養(yǎng)基接種1ml樣品，然后傾注混合均勻的培養(yǎng)基 15±1ml，混合均勻使其凝固，倒置，37℃培養(yǎng)16小時 ,24小時 和48小時，觀察結(jié)果 。
- 如果使用表面接種程序：將培養(yǎng)基傾注于已滅菌的培養(yǎng)皿中（用前貯存于2－8℃，避光，接種前應(yīng)先恢復(fù)至室溫）。樣品劃線接種或者涂布接種于 培養(yǎng)基表面，在37℃培養(yǎng)18小時，24小時和48小時，觀察結(jié)果。
【貯存】
1、法國科瑪嘉VRE顯色培養(yǎng)基干粉需保存在15-30℃干燥環(huán)境中，增補劑保存于2－8℃環(huán)境下。
2、傾注好的培養(yǎng)基在室溫可保存一天，2－8℃冰箱中避光可以貯存兩星期。
【結(jié)果】
微生物 | 菌落顏色 |
VRE糞腸球菌 、尿腸球菌 VRE雞腸球菌、鉛黃腸球菌 其他革蘭氏陽性細菌 革蘭氏陰性菌 | 玫瑰色至紫色 藍色或被抑制 被抑制 被抑制 |
★ 極少數(shù)其他菌屬菌株如乳酸桿菌素可能呈現(xiàn)很小的紫色菌落。
★ 使用過的培養(yǎng)基需要在121℃滅菌至少20分鐘才可以按照有關(guān)規(guī)定丟棄。
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